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中科院研究開發(fā)出新型生物3D打印體系 

2022-02-28 08:33
生物3D打印(3D Bioprinting)技術(shù)利用3D打印機將含有細(xì)胞和生物材料的生物墨水(Bioink)打印出特定的形狀結(jié)構(gòu),是最有希望實現(xiàn)在體外制造人類器官的新興技術(shù)之一。

然而,目前的生物3D打印機技術(shù)還無法制造具有生理功能且能夠長期存活的復(fù)雜器官,其主要原因是現(xiàn)有的生物3D打印機只能在水平和豎直方向上“逐層累加”地打印細(xì)胞,無法實現(xiàn)細(xì)胞和血管網(wǎng)絡(luò)的有機融合,從而導(dǎo)致打印后的細(xì)胞缺少營養(yǎng)供給而難以長期存活。

此外,為使逐層打印的生物墨水能夠快速固定成型,現(xiàn)有生物3D打印技術(shù)均需在生物墨水中添加可固化的生物材料,這些材料雖然可以在短時間內(nèi)固定細(xì)胞,但會顯著影響細(xì)胞存活和功能。
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為解決上述問題,中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所王秀杰團(tuán)隊與英國曼徹斯特大學(xué)教授王昌凌(Charlie C.L. Wang)團(tuán)隊、清華大學(xué)教授劉永進(jìn)團(tuán)隊合作, 創(chuàng)造性地將六軸機器人改造成為生物3D打印機(六軸機器人生物打印機)。

六軸機器人具有六個可以360°自由轉(zhuǎn)動的關(guān)節(jié),理論上可以在空間內(nèi)的任意角度進(jìn)行細(xì)胞打印(圖A)。 為避免生物材料固定給細(xì)胞帶來的負(fù)面影響,科研人員開發(fā)了油浴細(xì)胞打印體系(Oil-Bath-Based Cell Printing),即在礦物油的疏水作用力下,打印的細(xì)胞可以不受重力影響而穩(wěn)定地貼附在生物支架的任意表面,并自發(fā)地與生物支架和周邊細(xì)胞形成緊密連接。

結(jié)合兩種新開發(fā)的體系,可以實現(xiàn)在復(fù)雜血管支架上進(jìn)行細(xì)胞全方位打印,打印的細(xì)胞具有與人工操作相同的存活率(>98%),并且能夠保持正常的細(xì)胞周期和生理功能。

科研人員進(jìn)一步從組織器官發(fā)育的角度出發(fā),設(shè)計了循環(huán)式“打印-培養(yǎng)”的器官制造方案,在血管支架上打印若干層細(xì)胞后,將其進(jìn)行一段時間的共培養(yǎng)以誘導(dǎo)打印細(xì)胞間形成具有功能的胞間連接和新生毛細(xì)血管,然后再進(jìn)行新的一輪細(xì)胞打印。重復(fù)這一“打印-培養(yǎng)”過程,可以使打印組織內(nèi)部形成與體內(nèi)器官類似的血管網(wǎng)絡(luò),從而支持打印組織器官的長期存活。
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新型六軸機器人生物打印機及其打印產(chǎn)品。(A)六軸機器人生物打印平臺和由打印的綠色熒光血管內(nèi)皮細(xì)胞組成的IGDB字母;(B)由六軸機器人生物打印平臺完成的具有新生血管功能的人造血管(左側(cè)及中央,綠色表示血管內(nèi)皮細(xì)胞)以及血管化心肌組織(右側(cè),綠色表示心肌組織,紅色表示血管網(wǎng)絡(luò));(C)雙機器人協(xié)作打印平臺(左側(cè))可以在復(fù)雜血管支架上協(xié)同打印不同類型細(xì)胞(中央)并形成特定的細(xì)胞排布模式(右側(cè))
應(yīng)用上述技術(shù)和方案,科研人員在血管支架上開展了血管內(nèi)皮細(xì)胞和心肌細(xì)胞打印實驗。

六軸機器人生物打印機結(jié)合油浴細(xì)胞打印體系可以在復(fù)雜血管支架上打印完整的內(nèi)皮層,并且可以在生血管因子的輔助下生長出新血管和毛細(xì)血管網(wǎng)絡(luò)(圖B);打印的心肌細(xì)胞能夠在短時間內(nèi)形成間隙連接,恢復(fù)并長時維持規(guī)律性搏動。通過循環(huán)式“打印-培養(yǎng)”方案協(xié)同打印血管內(nèi)皮細(xì)胞和心肌細(xì)胞,科研人員制造了具有毛細(xì)血管網(wǎng)絡(luò)、能夠在體外存活并且維持搏功能超過6個月的心肌組織(圖B)。

利用六軸機器人生物打印機低成本、高拓展性等優(yōu)點,科研人員進(jìn)一步建立了由兩個六軸機器人組成的協(xié)作打印平臺,實現(xiàn)了在復(fù)雜血管支架上快速而有序地協(xié)同打印多種類型細(xì)胞(圖C)。該研究報道的生物打印體系突破了傳統(tǒng)生物3D打印的平層局限,為復(fù)雜組織器官的體外制造提供了更可行的解決方案。

相關(guān)研究成果以A multi-axis robot-based bioprinting system supporting natural cell function preservation and cardiac tissue fabrication為題,在線發(fā)表在Bioactive Materials上。研究工作得到國家自然科學(xué)基金委和中科院戰(zhàn)略性先導(dǎo)科技專項的資助。

論文鏈接
https://www.sciencedirect.com/sc ... 22000743?via%3Dihub

來源: 遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所
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